双光子荧光显微成像

    双光子荧光显微成像 :

双光子荧光显微成像是21世纪以来刚刚发展起来的一种新型非线性光学成像方法，由于其优异的特性，已被广泛应用于生物细胞和组织的长时间动态三维成像。

1990年，美国康奈尔大学的W.登克等人将双光子激发用于荧光激发系统，制造出第一台双光子荧光显微镜。双光子荧光显微成像的原理是两个光子几乎“同时”（0.5飞秒之内）到达一个携带有荧光基团的生物分子，生物分子吸收光子的能量后进入活跃态，进而被激发出荧光。实际上，生物分子可以吸收更多的光子以达到活跃状态，吸收光子的效率和生物分子的物理性质及光源的时空分布有关。

双光子荧光显微成像的优点有：兼具近红外激发、暗场成像、可避免荧光漂白和光致毒、定向靶向激发、高横向分辨率与纵向分辨率、降低生物组织吸光系数及降低组织自发荧光干扰等。目前，该方法主要用于心理和行为细胞突触等亚细胞水平机制的研究。